Luuytimen aspiraatti auttaa parantamaan haavoittumattomia haavoja.

Kliininen tutkimus luuytimen aspiraatin tehokkuudesta keinona hoitaa haavoja, jotka eivät ole parantuneet. Tämän hoitomenetelmän hyväksymisessä tutkijat tukeutuivat immuunimoduloivaan vaikutukseen, kudosten elvyttämisen stimulointiin ja verenvuotoon.

Aspiraatti saatiin imemällä luuydin potilaan ileumista ja pantiin suoraan haavan pinnalle. Saatiin rohkaisevia tuloksia: viikon aikana haavan pinta väheni yli 50%, havaittiin epiteelin stimulaatio ja verisuonittuminen, haavat poistettiin nekroottisista elementeistä, mikä oli tärkeää haavan paranemisen kannalta. Kirjoittajat huomauttavat, että tällä tekniikalla on suuri tulevaisuus, mutta potilaiden merkittävässä osassa tarvitaan lisää kliinisiä tutkimuksia.

Luuytimen aspiraatti auttaa parantamaan haavoittumattomia haavoja.

Luuytimen pyrkimys

Mikä on luuytimen pyrkimys?

Luuytimen aspiraatio on prosessi, johon kuuluu näytteen ottaminen luut pehmeästä kudoksesta. Luuytimessä on luut sisältä löytynyt pehmeä kudos. Se sisältää soluja, jotka tuottavat valkosoluja, punasoluja ja verihiutaleita suuremmissa luissa, kuten:

Leukosyytit auttavat torjumaan infektioita. Erytrosyytit kuljettavat happea ja ravinteita. Verihiutaleet voivat paksua verta.

Jos täydellinen verenkuva osoittaa, että punasolujen, leukosyyttien tai verihiutaleiden lukumäärä tai toiminta on epänormaalisti korkea tai alhainen, lääkäri saattaa haluta tutkia luuytimestäsi syyn määrittämiseksi. Luuytimen aspiraatiota suoritetaan usein luuytimen biopsialla, jossa käytetään eri tyyppistä neulaa kudoksen poistamiseksi luuytimestä.

Miksi luuytimen imeytyminen suoritetaan?

Lukuisat olosuhteet liittyvät epäterveelliseen luuytimeen. Jos alustavassa verikokeessa on vähän valkoisia tai punasoluja tai verihiutaleita, lääkäri voi määrätä luuytimen imeytymisen. Testiä käytetään taudin tarkistamiseen sekä tietyn taudin etenemisen tai hoidon seurantaan.

Luuytimen ongelmiin liittyvät sairaudet ja sairaudet ovat:

anemia, joka on punasolujen määrä
luuytimen sairaudet, kuten myelofibroosi tai myelodysplastinen oireyhtymä
verisoluja, kuten leukopeniaa tai polysytemiaa
luuytimen tai veren syöpä, kuten hemokromatoosin leukemia tai lymfooma
, joka on geneettinen sairaus, jossa rautaa muodostuu veressä
, erityisesti krooniset sairaudet, kuten tuberkuloosi
varastointiin liittyvät sairaudet, kuten amyloidoosi tai Gaucherin tauti

Luuytimen aspiraatio voi myös olla tärkeä testi, jos sinulla on syövän hoito. Tämä voi auttaa määrittämään, onko syöpä levinnyt luuhun.

Mitkä ovat luuytimen pyrkimykseen liittyvät riskit?

Luuytimen tutkimukset ovat turvallisia, mutta kaikilla lääketieteellisillä toimenpiteillä on jonkinlainen riski. Harvinaisissa tapauksissa seuraavat komplikaatiot ovat mahdollisia:

allerginen reaktio anestesiaan
liiallinen verenvuoto
infektio
pitkäaikainen epämukavuus

Riskit ovat harvinaisia ja liittyvät useimmiten olosuhteisiin, jotka aiheuttavat heikentynyttä immuunijärjestelmää tai matalaa verihiutaleiden määrää. Heikentynyt immuunijärjestelmä voi tehdä sinusta alttiimpia infektiolle, ja alhainen verihiutaleiden määrä lisää liiallisen verenvuodon riskiä.

Miten valmistaudutaan luuytimen imeytymiseen

Sinun on kerrottava lääkärillesi kaikista lääkkeistä, joita saatat käyttää, mukaan lukien lääkkeitä sisältämättömät lääkkeet tai ravintolisät, ja sinun on myös kerrottava heille kaikista allergioista, joita sinulla on. Lääkärisi voi pyytää sinua lopettamaan tiettyjen lääkkeiden käytön ennen toimenpiteen aloittamista. Mutta sinun ei pitäisi lopettaa minkään lääkkeen käyttöä, ellei lääkäri anna sinulle tätä.

Kerro lääkärillesi, jos olet hermostunut menettelystä. Ne voivat antaa sinulle lievän rauhoittavan aineen, joka auttaa sinua suorittamaan menettelyn.

Noudata lääkärin ohjeita ennen menettelyä.

Miten luuytimen imeytyminen suoritetaan

Sinua pyydetään muuttamaan sairaalan vaatteita ja makaamaan puolella tai vatsassa. Kehosi peitetään kankaalla, niin että vain tutkimusalue on näkyvissä.

Lääkäri tarkistaa sykkeen ja verenpaineen ennen luuytimen imeytymistä.

Ennen toimenpidettä saat paikallispuudutuksen tainnuttaa alueen, jossa pyrkimys tapahtuu. Tämä on yleensä lonkkanivelen takana. Joskus se voidaan ottaa rintakehästä.

Lääkäri tekee pienen viillon, joka helpottaa onttojen neulojen pääsyä iholle. Neula menee sitten luuhun. Lääkärisi käyttää neulan takaosassa olevaa ruiskua luuytimen nestemäisen osan vetämiseksi ulos.

Välittömästi toimenpiteen jälkeen viilto on sidottu, ja siirryt toiseen huoneeseen, ennen kuin lähdet kotiin.

Luuytimen imeytymisen jälkeen

Saatat tuntea hieman kipua noin viikon kuluttua menettelystä. Voit yleensä antaa sitä OTC-kipulääkkeillä. Sinun on myös huolehdittava viiltohaavasta. Haava on pidettävä kuivana 24 tuntia toimenpiteen jälkeen.

Kun hoidat haavaasi, luuytimen näyte lähetetään laboratorioon testausta varten. Lääkärisi tarkistaa testitulokset kanssasi seurantakokouksen aikana.

Hematopoieesin pahanlaatuisten sairauksien luuytimen aspiraatin mikroskooppinen tutkimus - vertailu kahdella menetelmällä dioja valmistettaessa

Monien neoplastisten hematopoieettisten sairauksien diagnosoinnissa tarvitaan luuytimen aspiraattien mikroskooppista tutkimusta. Vuonna 2008 kansainvälinen hematologian standardointikomitea suositteli kahden tyyppisiä dioja, joita käytettiin luuytimen mikroskooppiseen arviointiin: kiilamainen kalvo ja kalvon puristamiseen tarkoitetut kalvot. Koska näitä menetelmiä ei ole vielä verrattu, teimme tällaisen vertailun. Arvioitiin tavallisia luuytimen näytteitä 250 potilaasta, jotka oli diagnosoitu erilaisista neoplastisista hematologisista häiriöistä. Tärkeimmät erot kahden vertailutavan menetelmän välillä todettiin 13 potilaalla, joilla ei ollut Hodgkinin lymfooma, seitsemän systeemistä mastosytoosia sairastavaa potilasta ja 11 akuuttia leukemiaa tai myelodysplastisia oireyhtymiä tai kroonista myelomonosyyttistä leukemiaa sairastavia. Eroja havaittiin myös monilla multippeli myelooman potilailla, mutta näiden poikkeamien kliininen merkitys oli melko vaatimaton. Tärkeimmät syyt havaittuihin eroihin olivat ilmeisesti luuytimen laimentuminen veren kanssa ja monien neoplastisten solujen polttokasvu. Uskomme, että murskaustekniikka on kannattavampaa kuin elokuvissa, joissa on kiila-laajennus. Siksi suosittelemme murskauskalvojen käyttämistä ensisijaisena menetelmänä diagnoosin perustamiseksi tai terapeuttisten päätösten tekemiseen luuytimen mikroskooppisen tutkimuksen perusteella.

Luuytimen mikroskooppinen tutkimus on yksi hematologian keskeisistä diagnoosimenetelmistä. Maailman terveysjärjestön (WHO) luuytimen ja imusolmukkeiden pahanlaatuisten kasvainten diagnosointiin liittyvien viimeisimpien suositusten mukaan luuytimen mikroskooppisen tutkimuksen merkitys ei ole vähentynyt; pikemminkin määritettiin tarkemmat morfologiset kriteerit, jotta vältettäisiin epäselvyys.

Monien sairauksien kohdalla havaittiin spesifisempiä immunologisia tai molekyylimarkkereita, jotka mahdollistivat epätyypillisten solujen lukumäärän tarkemman arvioinnin mikroskooppiseen tutkimukseen verrattuna. Tällaiset markkerit eivät kuitenkaan ole käytettävissä kaikissa sairauksissa, ja mikroskooppinen tutkimus on ainoa tai pääasiallinen diagnoosimenetelmä ja hoidon seuranta. Lisäksi sairauksiin, joissa diagnoosi perustuu geneettisiin menetelmiin tai immunofenotyyppiin, tarvitaan luuytimen jaksollisia mikroskooppisia tutkimuksia, jotta voidaan nopeasti tarkistaa transformaatiotilan tai sekundäärisen dysplastisen muutoksen eri ilmenemismuodot. WHO: n luokitus asettaa erittäin suuret odotukset sytologeille, koska lopullinen diagnoosi perustuu usein luuytimen solujen koostumuksen asianmukaisiin arvioihin. Kliinisessä käytännössämme erilaisten laboratorioiden suorittamat arvioinnit luuytimen imeytymisestä samassa potilaassa tuottivat erilaisia tuloksia, vaikka kukin arviointi tehtiin vastaavasti. Nämä erot johtuivat pääasiassa kahden liukuvalmistusmenetelmän olemassaolosta. Kansainvälinen hematologian standardointikomitea (ICSH) suosittelee, että luuytimen mikroskooppista arviointia varten käytetään kahdenlaista dioja: kiilamainen kalvo (tekniikka 1) ja olkikalvo- (tekniikka 2) diat [1]. Näitä kahta edellä mainittua menetelmää ei ole vielä verrattu diagnoosin ja seurannan kannalta merkityksellisinä potilailla, joilla on hematologisia häiriöitä. Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli verrata kiilan leviämisen ja kalvojen murskauksen menetelmiä ja määrittää, mikä niistä sopii hematologisten häiriöiden tiettyjen ryhmien diagnosointiin ja / tai seurantaan.

Luuydinnäytteitä kerättiin 250 potilaasta, jotka oli diagnosoitu ja hoidettu Gdanskin lääketieteellisen yliopiston hematologian ja transplantaation osastolla. Luuytimen aspiraatit otettiin takaosan selkärangan selkäydestä ICSH: n suositusten mukaisesti [1]. Ainoastaan luuytimen aspiraatteja, jotka sisälsivät hiukkasia, analysoitiin. Kunkin luuytimen näytteestä valmistetut tahrat valmistettiin käyttäen molempia tekniikoita saman asiantuntijan toimesta enintään 20 minuutin ajan aspiraation jälkeen. Tekniikassa 1 näyte levitettiin lasilevylle toisen lasin reunalla, kun taas tekniikassa 2 hiukkaset puristettiin kahden lasilevyn väliin. May-Grunwald-Giems -menetelmällä värjäyksen jälkeen objektilevyt tutkittiin mikroskooppisesti ICSH: n ohjeiden [1] mukaisesti. Menetelmän 1 mukaisesti valmistetuissa dioissa suoritettiin alkion differentiaalinen lukumäärä soluja luuytimen hiukkasten välittömästi edessä olevilla alueilla. Menetelmällä 2 saaduissa dioissa analysoitiin vain hyvin jakautuneita luuytimen soluja luuytimen hiukkasten ympärillä. Alueet, joissa oli merkittävä määrä vaurioituneita soluja, jätettiin pois. Luuytimen solujen tiheyttä arvioitiin kasvattamalla x 100 ja x 400 ja sitä kuvattiin seuraavasti: aplastinen, hyvin alhainen, matala, keskitaso, korkea tai lisääntynyt. Samoja korotuksia käytettiin seuraavien megakaryosyyttien lukumäärän arvioimiseen: megakaryosyyttien puuttuminen, hyvin pieni määrä megakaryosyyttejä, alhainen, keskikokoinen, korkea tai hyvin suuri määrä megakarysyyttejä. Sitten valituilla alueilla suoritettiin nukleotidiluvun omaavien differentiaalisten solujen laskeminen (kuvio 1). Vähintään 1000 solua laskettiin. Solut tunnistettiin yleisesti hyväksyttyjen standardien [2-4] mukaisesti. Yksittäisten solulinjojen kvantitatiiviset arviot suoritettiin kasvattamalla x 500 ja x 1000. WHO: n suositusten mukaan dysplastisia muutoksia arvioitiin laadullisesti 200 solussa erytropoieesia ja granulopoieesia ja 30 megakaryosyytissä (mahdollisuuksien mukaan) [5]. Kullekin potilaalle verrattiin ja arvioitiin molempia tekniikoita käyttäen valmistettuja dioja, ja kussakin tapauksessa yritettiin analysoida mahdollisten erojen syitä. Jotta vältettäisiin eri toimijoiden tekemiin arvioihin liittyvä harhaa, sama henkilö teki kaikki mikroskooppiset tutkimukset sokeasti. 1 Luuytimen imeytys, joka on valmistettu käyttämällä 1 (a) ja 2 (b) -tekniikoita, joiden suurennus on × 100 (kunkin kuvan yläosa) ja suurennus × 400 (kunkin kuvan alaosa)

Useimpien muuttujien jakautuminen oli epänormaalia (Kolmogorov-Smirnov-testi, p 5%, mikä osoitti sytologisen remissioiden puuttumista, todettiin 12 potilaalla, kun arvioitiin menetelmää 2 käyttäen valmistettuja dioja, ja vain seitsemän potilasta valmistettiin käyttäen 1. Huolimatta siitä, että räjähdyssolujen selkeä kasvu tekniikalla 1 saaduissa dioissa on osoitettu, viiden potilaan dioille osoitettiin merkittävä lisäys tekniikalle 2. Numeeriset arvot on esitetty Taulukko 5. Taulukko 5 Kliinisesti merkittäviä eroja domeenisolujen prosenttiosuudessa luuytimen aspiraatteissa, jotka on kerätty AL-hoitoa saaneilla potilailla

Luuytimen mikroskooppinen tutkimus on pitkään yksi tärkeimmistä diagnoosimenetelmistä hematologiassa. Siksi on erittäin tärkeää tietää, että tutkimuksen aikana voidaan tunnistaa erilaisille sairauksille ominaisia diagnostisia tuloksia riippuen käytetystä liukuvalmistusmenetelmästä. Vaikka korostimme eräitä eroja, jotka näyttävät riippuvaisilta kaikkien neoplastisten hematopoieettisten sairauksien ryhmässä käytetystä liukuvalmistustekniikasta, kaikki eivät olleet kliinisesti merkittäviä. Esimerkiksi käytetystä tekniikasta riippumatta lymfosyyttinen tunkeutuminen oli diagnostista B-CLL: lle. Useimmissa muissa häiriöryhmissä kriittisillä arvoilla on kuitenkin eroja mikroskooppisen tutkimuksen avulla havaittujen tulosten välillä käytetystä menetelmästä riippuen.

Lymfosyyttisen tunkeutumisen arviointi ei-Hodgkinin lymfoomassa on aina vaikeaa luuytimen mikroskooppisessa tutkimuksessa ainakin kahdesta syystä. Ensinnäkin luuytimen tunkeutuminen on usein polttoväli; toiseksi jotkut lymfoomasolut, jotka ovat peräisin perifeerisestä imusolmukärjestelmästä, voivat siirtyä luuytimeen veren kanssa, mikä joskus viittaa infiltraatioon rajoitetussa määrin. Vertailu osoitti, että menetelmä 2 oli hyödyllisempi luuytimen tunkeutumisen arvioimiseksi lymfoproliferatiivisilla prosesseilla, pääasiassa polttoväreillä, mikä on yhdenmukainen julkaistujen suositusten [1] kanssa. Tämän menetelmän avulla saaduista dioista saatu johtopäätös korreloi paremmin trepiinibopsioiden tutkimuksen tulosten kanssa. Tekniikka 2 aiheuttaa tulkintavaikeuksia erityisesti silloin, kun luuytimessä on hyvänlaatuisia lymfosyyttisiä aggregaatteja, jotka voivat esiintyä sekä normaalissa luuytimessä että tulehdusprosessin aiheuttamassa luuytimessä. Tällaiset aggregaatit voivat vaihdella kooltaan, ne ovat hyvin erilaista ympäröivistä hematopoieettisista soluista ja koostuvat pääasiassa lukuisista kypsistä lymfosyyteistä, joissa on useita lymfoidisoluja, histososyyttejä, plasman soluja ja lymfosyyttien välissä olevia makrofageja. Luuytimen aspiraateissa lymfoidisten aggregaattien esiintymistiheys ei yleensä ylitä 20%; Kuitenkin ruumiinavaustutkimukset osoittivat heille 62% biopsiasta [6, 7]. Tällaisten lymfoidisolujen aggregaatin solujen koostumus voi usein osoittaa niiden luonteen. Suuri prosenttiosuus enemmän tai vähemmän polymorfisia lymfoidimuotoja kuin kypsiä lymfosyyttejä voi merkitä pahanlaatuista tunkeutumista. Virtaussytometriaa käytetään usein menetelmänä tällaisten aggregaattien klonaalisen alkuperän tarkistamiseksi [6]. Virtaussytometria-tutkimuksen negatiivinen tulos ei kuitenkaan sulje pois sitä tosiasiaa, että luuytimessä voi olla vielä neoplastisia imusolmukkeita. Edellä mainituista syistä objektiivisin tapa tutkia fokaalisen lymfoproliferatiivisen tunkeutumisen vahvistamista luuytimessä on trefiinibiopsia [8].

Useiden myelooman diagnostiikkakriteerit ovat viime vuosina muuttuneet merkittävästi ja tällä hetkellä plasman solujen prosenttiosuutta luuytimessä ei pidetä ratkaisevana diagnoosin vahvistamiseksi. Plasman solujen lukumäärää ≥30% ja 10–29%, jotka on määritelty ”perus-” ja ”vähäisiksi” myelooman kriteereiksi (edellisen WHO-luokituksen mukaan), ei enää käytetä. On arvioitu, että useimpien potilaiden ensimmäisen diagnoosin aikana vahvistettujen plasmasolujen prosenttiosuus on ≥10%. Tämä tila ei ole noin 10%: lla potilaista, joilla on multippeli myelooma (MM) [9]. Tässä tutkimuksessa osoitimme, että plasman solujen prosenttiosuuksien erot ovat erityisen suuret riippuen siitä, miten valmistetaan dioja, joita käytetään luuytimessä olevien plasmasolujen aggregaattikasvun luonteen yhteydessä. Näin ollen rutiinitutkimukset patologiasta ja teknologian 2 käyttö mikroskooppisten tutkimusten osalta ovat täysin perusteltuja. Tällä hetkellä MM: n diagnoosin vahvistamiseksi on tarpeen osoittaa, että luuytimessä on plasman solukloonia, joka tarvitsee muita menetelmiä, kuten virtaussytometriaa. Virtaussytometriaa ei kuitenkaan voida pitää mikroskooppisen tutkimuksen korvaavana aineena [10]. Kirjoittajat osoittivat, että vaikka virtaussytometrinen arviointi vahvistaa plasman solukloonien läsnäolon luuytimessä, plasman solujen prosenttiosuus on paljon pienempi kuin morfologisissa tutkimuksissa, usein enintään 5%. Siksi näyttää perustellulta olla suositeltamatta virtaussytometriaa plasman solujen tunkeutumisen laajuuden arvioimiseksi, ja sen pitäisi arvioida käyttäen patologisia tutkimuksia tai mikroskooppisia arviointeja käyttäen tekniikkaa 2 käyttäen saatuja dioja.

Rasvasolut, jotka ovat osa luuytimen stromaa, ovat lähinnä luuytimen partikkeleita. Niinpä nämä solut näkyvät harvoin etäisyydellä hiukkasista, ja jos menetelmän 1 mukaisesti valmistetussa liukussa on useita kaukaisia mastosoluja, tämä voi viittaa siihen, että luuytimen todellinen massa- solujen lukumäärä on itse asiassa paljon suurempi. Tämä lisäys ei kuitenkaan anna mitään informaatiota siitä, miksi tämä lisääntynyt nielusolujen määrä lisääntyy, mikä voi liittyä reaktiiviseen tulehdusprosessiin. Luuytimen partikkeleissa lokalisoituneet mastosolujen aggregaatit osoittavat voimakkaasti proliferaatioprosessia [11]. Tällaisia aggregaatteja havaittiin useimmissa liukulevyissä, jotka saatiin käyttäen tekniikkaa 2, joka saatiin potilailta, joilla oli lopulta vahvistettu SM-diagnoosi. Tekniikkaa 1 käyttäen valmistetuissa dioissa tällaisia aggregaatteja ei voitu tunnistaa pilkkomattomilla luuytimen hiukkasilla. Kun käytettävissä on vain muutama mastosolu, ei ole mahdollista määrittää epätyypillisten muotojen prosentuaalista osuutta, mikä on yksi kriteereistä CM: n diagnosoinnissa [12]. Siksi SM: n mikroskooppiset tutkimukset olisi suoritettava menetelmällä 2 valmistetuilla dioilla. Tekniikkaa 1 käyttäen valmistetuissa dioissa luuytimen kuva oli yleensä epäselvä ja epäselvä, ja SM: lle ominaiset muutokset havaittiin vain, kun merkittävä infiltraatio oli läsnä. On kuitenkin korostettava, että trepiinibiopsia on välttämätön jokaiselle systeemistä mastosytoosia epäillylle potilaalle.

Luuytimen mikroskooppinen tutkimus on ehdottoman tärkeää AL: n, MDS: n ja CMML: n diagnosoinnissa. Aiemmin käytetty Franco-American-British -luokitus luokitteli nämä kasvaimet vain sytologisten ja sytokemiallisten ominaisuuksien perusteella [13, 14]. Diagnostiikkakriteerit paranivat merkittävästi lisäämällä immunofenotyyppiä, sytogeneettistä ja molekyyli- testausta. Monet arvokkaat tiedot antavat arvion trefiinibiopsiasta, joka on aina tehtävä, jos epäillään myelodysplastista oireyhtymää. Tästä huolimatta mikroskooppinen arviointi on edelleen ratkaiseva tekijä verkkotunnus solujen syrjinnälle. Lisäksi ei ole parempaa menetelmää räjähdyksen määrän arvioimiseksi luuytimessä. Virtaussytometrianalyysi, joka perustuu CD34 + -solujen laskemiseen, ei voi korvata mikroskooppista tutkimusta, koska jokainen räjähtävä solu ei ekspressoi CD34-antigeeniä. Lisäksi virtaussytometrianalyysi riippuu suuresti veren luuytimen laimennoksesta sekä luuytimen fibroosista [15]. Edellä mainitut rajoitukset voivat johtaa väärin alhaiseen prosenttiosuuteen domeenisoluja. Tällä hetkellä käytössä oleva MDS-luokitus ei perustu pelkästään lisääntyneen dysplasian esiintymisen vahvistamiseen vaan myös räjähtävien solujen lukumäärään veressä ja luuytimessä. Tällä viimeisellä parametrilla on merkittävä ennakoiva arvo ja se sisältyy kolmeen parametriin, jotka ovat välttämättömiä kansainvälisen ennustejärjestelmän luomiseksi, jota puolestaan käytetään terapeuttisten päätösten tekemiseen [16]. Havaittiin, että molemmat diavalmistustekniikat ovat yhtä herkkiä dysplastisten poikkeavuuksien havaitsemiselle. Tekniikka 2 on hyödyllinen verihiutaleiden arvioinnin kannalta: megakaryosyyttien lukumäärä on tavallisesti paljon suurempi, ja ytimien muodossa olevat yksityiskohdat ovat helpommin nähtävissä. Kuitenkin, jos dysplasian laadulliset ominaisuudet ovat heikkoja, ja räjähdysten määrä on hallitseva poikkeama, menetelmän 1 käyttäminen voi johtaa virheellisiin negatiivisiin tuloksiin eikä salli MDS: n diagnoosin vahvistamista. Erot domeenisolujen lukumäärässä MDS: ssä eivät ilmeisesti liittyneet luuytimen laimennukseen perifeerisen veren kanssa, vaan myös siihen, että räjähdyssolut voidaan yhdistää klustereihin luuytimen hiukkasissa. Nämä hiukkaset ovat selvästi nähtävissä trefin-biopsian tutkimuksissa, yleensä MDS: n kehittyneemmissä muodoissa [15]. Siksi uskomme, että tekniikka 2 on luotettavampi MDS: n diagnosoimiseksi ja korreloi paremmin potilaiden kliinisen kuvan kanssa.

Kliinisesti merkittävät erot kummankin luuytimen valmistusmenetelmässä liittyvät usein akuutteihin leukemioihin, jotka liittyvät monitasoiseen myelodysplasiaan tai sekundaarisiin leukemioihin. Melko usein myelodysplastinen oireyhtymä, kuten tekniikalla 1 tuotetuissa dioissa on osoitettu, tunnistetaan akuutin leukemian kalvoksi, joka on saatu menetelmän 2 mukaisesti. on suositeltavaa käyttää suurinta prosenttiosuutta räjähdyssoluista liuoksista, jotka on saatu tekniikalla 1 tai tekniikalla 2. Tämä lähestymistapa täyttää kriteerit, joilla tunnistetaan krooninen domeenisolujen kriisi myelooinen leukemia [17].

Kemoterapian vaikutusten seuranta akuutissa leukemiassa edellyttää todennäköisesti kaikkein tarkimpia diagnostisia menetelmiä, jotka perustuvat pääasiassa immunologisiin ja / tai molekyylimenetelmiin. Mikroskooppinen tutkimus on menettänyt merkityksensä, koska se ei useinkaan tarjoa tarkkuutta, jota monet modernit hoito-ohjelmat edellyttävät. Tutkimuksemme osoitti, että luuytimen arviointi käyttäen tekniikkaa 1 osoitti remissiota, kun taas menetelmällä 2 valmistetuissa dioja sisältävässä tutkimuksessa ei otettu remissiota. Virtaussytometrian tutkimusten tulisi osoittaa räjähdysmäärä, joka on samanlainen kuin tekniikalla 1 saadut merkinnät. On muistettava, että kun tehdään terapeuttisia päätöksiä, virtaussytometria yleensä havaitsee pienemmän määrän domeenisoluja kuin mitä voisi olla.

Esitetyt tulokset vahvistavat, että luuytimen mikroskooppinen tutkimus potilailla, joilla on yksi useista neoplastisista hematopoieettisista häiriöistä, voi tuottaa erilaisia tuloksia riippuen dioja valmistettaessa käytetystä menetelmästä. Monet tekniikalla 2 valmistetuissa dioissa helposti havaittavissa olevista merkittävistä oireista (esimerkiksi fokaalisten lymfosyyttien tai tukisolujen tunkeutuminen) ei välttämättä havaita tekniikalla 1 saatuja dioja. Toisaalta joissakin erityisissä tilanteissa (esimerkiksi fleecy-imusoluja), menetelmä 1 voi säilyttää yhden solun morfologian. Siksi kannatamme täysin ICSH: n ohjeita, joissa todetaan, että mikroskooppinen tutkimus on suoritettava käyttäen mitä tahansa näistä tekniikoista valmistettuja kalvoja. Uskomme, että tekniikka 2 on edullisempi verrattuna tekniikkaan 1. Lisäksi menetelmällä 2 saatuja dioja käyttämällä saadut tulokset korreloivat paremmin kliinisen kuvan ja trepiinibiopsian tutkimuksen tulosten kanssa. Siksi suosittelemme, että käytät menetelmää 2 pääasiallisena menetelmänä diagnoosin tekemiseksi tai terapeuttisten päätösten tekemiseksi luuytimen mikroskooppisen tutkimuksen perusteella.

Eturistiriita Tekijät eivät julista eturistiriitaa.

Avoin käyttöoikeus Tämä artikkeli on jaettu Creative Commons Attribution -lisenssin, joka ei ole kaupallinen, käyttö, joka sallii kaiken ei-kaupallisen käytön, levityksen ja jäljentämisen millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen (t) ja lähde on hyvitetty.

Mikä on luuytimen pistos ja mitä analyysi näyttää?

Luuydinrei'itys on diagnostinen menetelmä, jota käytetään veri- ja verisuonijärjestelmään vaikuttavien tautien seurantaan tai tunnistamiseen. Punktiota käytetään myös estämään tai vahvistamaan anemiaa, leukemiaa ja muita hematologisia sairauksia. Luuytimen tutkimus on määritetty fyysisen tarkastelun ja potilaan historian perusteella. Artikkelissa tarkastellaan, mitä se on - luuytimen pistos.

Mikä on luuytimen puhkeaminen?

Ennen toimenpiteen suorittamista virtsarakko ja suolet on tyhjennettävä, eikä muita diagnostisia tutkimuksia tai kirurgisia toimenpiteitä suositella pistospäivänä.

Luuydin koostuu kantasoluista, jotka ovat suuria erottamattomia soluja. On olemassa kaksi kantasolujen päätyyppiä, ja siten luuytimessä on kaksi solukudosta. Yksi tyyppi on mukana verisolujen tuotannossa, ja toinen on stromisolujen tuotannossa.

Luuytimen aspiraatiota käytetään pääasiassa morfologian arvioimiseen ja erilaisten solujen lukumäärän saamiseen. Aspiraation aikana saatu materiaali voidaan tutkia sytogeneettisillä, molekyylisillä, mikrobiologisilla, immunohistokemiallisilla ja sytometrisillä menetelmillä.

Biopsia ja sen jälkeinen histologinen tutkimus mahdollistavat luuytimen yleisen solukyvyn arvioinnin, polttovikojen tunnistamisen ja eri patologisten mikro-organismien tunkeutumisasteen määrittämisen.

Potilaat ovat kiinnostuneita: mistä luuydin tulee? Puhkauksen aikana luuydin poistetaan erityisellä neulalla lantion luusta tai rintalastasta. Laboratoriossa voidaan havaita erilaisia verisolujen kypsyysvaiheita. Myelogrammin avulla on mahdollista tunnistaa veren tai verenvuodon järjestelmän sairaudet.

Luuydinnäytteet voidaan saada aspiraatiolla tai biopsialla. Aspiraatiomenetelmällä saatu näyte on puolijäähdytteinen, joten patologi voi tutkia sen valomikroskoopilla ja analysoida virtaussytometrialla, sytogeneettisellä, kromosomianalyysillä ja polymeraasiketjureaktiolla (PCR).

Trepanobiopsia on eräänlainen lävistysbiopsia, jossa otetaan kiinteä luuytimen kudos. Näytettä voidaan käyttää immunohistokemialliseen analyysiin. Päädiagnoosin selvittämiseksi käytetään useimmiten luuytimen trepanobiopsiaa.

todistus

Luuytimen puhkeaminen tapahtuu siinä tapauksessa, että lääkärillä on epäilyksiä veren ja verenmuodostusjärjestelmän sairaudesta.

Anemian, leukemian, luuytimen aplasian diagnosointi tai seuranta;
Luuytimen metastaasien diagnosointi (kasvainten leviäminen muista elimistä);
Kantasolujen saaminen elinsiirtoa varten.

Leukemia on yleisin luuytimen tauti. Termi "leukemia" sisältää erilaisia pahanlaatuisia sairauksia, jotka kaikki ovat samankaltaisia, koska ne ovat peräisin lymfosyyttien prekursoreista. Nämä muuttuneet solut levisivät vähitellen punaiseen luuytimeen, mikä vaikutti veren normaaliin muodostumiseen. He tulevat myös verenkiertoon, josta he tunkeutuvat imusolmukkeisiin, pernaan, maksaan ja muihin sisäelimiin. Lisäksi funktionaalisten verisolujen puute aiheuttaa anemiaa potilailla.

Vasta

Kun dekompensoitua muotoa ei suositella luuytimen punkkio.

Luuytimen tutkimukseen liittyy useita vasta-aiheita. Ainoa absoluuttinen syy, jonka vuoksi tutkimusta ei voida suorittaa, on vakavien verenvuotojen esiintyminen, koska verenvuoto voi tapahtua toimenpiteen jälkeen.

Jos lonkkanivelessä on kehittynyt vakava infektio, on valittava toinen paikka tutkittavaksi. Luuydin aspiraatio ja biopsia voidaan suorittaa ilman riskiä jopa äärimmäisen trombosytopenian (alhainen verihiutaleiden määrä) yhteydessä.

Mahdolliset komplikaatiot

Terävä pistos voi aiheuttaa voimakasta kipua. Tämä lyhyt ja terävä kipu pysähtyy nopeasti; sitä voidaan vähentää myös sopivilla kipulääkkeillä. Lisäksi harvinaisissa tapauksissa luuytimen pistos voi aiheuttaa seuraavia komplikaatioita:

Verenvuoto ja infektio pistoskohdassa;
Vierekkäisten elinten ja kudosrakenteiden trauma ja tulehdus;
Hengityselinten tai sydän- ja verisuonitaudit, jotka johtavat rauhoittavien aineiden tai kipulääkkeiden käyttöönottoon.

Punktiolla - kuten muissa tutkimuksissa ja hoitomenetelmissä - voi esiintyä mahdollisesti ei-toivottuja komplikaatioita. Monet potilaat saattavat olla huolissaan pistokohdan aiheuttamasta voimakkaasta kivusta. Selittämättömien sairauksien seuraukset voivat kuitenkin olla vakavampia kuin menettelyn kipu.

Muita haitallisia vaikutuksia ovat:

Hematomat ja paiseet;
Sepsis (verenmyrkytys);
Rei'itys ja vammat (viereiset elimet, hermot, verisuonet).

Luuydin voidaan puhkaista ambulanssi- tai sairaalahoidossa (Sisätautien, Hematologian, Onkologian laitoksella). Riippuen lääkärin tilanteesta tarvitaan neuvoja tai ohjeita.

Menettelyn edistyminen

Parasetamolia tai muita kipulääkkeitä voidaan ottaa kivun lievittämiseksi useita päiviä.

Aspiraatiopunktio suoritetaan ensin. Imuputki työnnetään ihon läpi käsin, kunnes se saavuttaa luun. Sitten neula etenee periosteumin läpi (jäykkä luun ulkokerros) aivojen onteloon. Heti kun neula menee luuytimen aspiraattiin, otetaan nestettä. Tämä vaatii jonkin verran tarkkuutta lääkärin liikkeissä toimenpiteen aikana, jotta näytteessä ei esiinny kohonneita veripitoisuuksia.

Jos aspirointi ei riitä, suoritetaan biopsia luuytimen alueelle. Käytetään suurta neulaa, joka sijoitetaan ja kiinnitetään luukuoreen. Sitten neula työnnetään kiertoliikkeeseen ja käännetään, jotta saadaan kiinteä luuytimen aine. Tuloksena oleva näyte poistetaan potilaasta yhdessä neulan kanssa. Menettelyn kesto voi olla 10 - 15 minuuttia.

Jos epäillään pahanlaatuista muutosta luuytimessä, voidaan suorittaa myös lyöntibiopsia. Laboratoriossa poistettu kudos voidaan leikata, värjätä ja tutkia mikroskoopilla. Useimmiten lyönnin biopsia suoritetaan lapsilla.

Menettelyn päätyttyä potilasta pyydetään yleensä makaamaan 5-10 minuuttia. Tämän jälkeen, jos verenvuotoa ei ole, potilas voi nousta ja palata päivittäiseen toimintaansa. Potilas voi ottaa parasetamolia tai muita yksinkertaisia kipulääkkeitä kivun lievittämiseksi 2-3 päivän ajan. Kivun, punoituksen, kuumeen, verenvuodon tai turvotuksen paheneminen vaatii lääkärin apua. Potilaita kehotetaan olemaan pesemättä puhkaistua aluetta 24 tunnin ajan tartunnan välttämiseksi.

Tutkimuksen valmistelu

Verenkiertoon vaikuttavat lääkkeet on lopetettava viikkoa ennen menettelyä.

Luuytimen pistos on lyhyt avohoito. Syke, verenpaine ja muut arvot seurataan lääkäriin tunnin ajan. Jos potilas sai kipulääkkeen tai rauhoittavan aineen ennen toimenpidettä, autoa ei saa ajaa päivässä. On aina tarpeen kuulla lääkärin kanssa, jotta vältetään mahdolliset menettelyn seuraukset. Lääkäri kertoo sinulle, mitä lääkkeitä tai toimenpiteitä ei suositella ennen menettelyä. Joskus se voi olla hyvin tuskallista menettelyn aikana. Normaalisti voimakkaan kivun pitäisi olla poissa.

Ennen puhkaisua lääkäri kysyy potilaalta aiemmat sairaudet ja lääkkeet, jotka on otettu aikaisemmin. Jos potilas käyttää veren ohuita lääkkeitä, sinun on ilmoitettava siitä lääkärillesi. Aspiriini ja muut verenkiertoon vaikuttavat lääkkeet on lopetettava viikkoa ennen menettelyä.

tulokset

Mitä luuytimen puhkeaminen näyttää? Luuydinpunktiotutkimusta käytetään monien sairauksien tunnistamiseen, mukaan lukien leukemia, multippeli myelooma, lymfooma, anemia ja pancytopenia. Paljon tietoa verestä voidaan saada rutiinitutkimuksen avulla - yleiset tai biokemialliset verikokeet. Kuitenkin sairauksien alkuperän tuntemiseksi on joskus tarpeen tutkia verisolujen lähdettä.

Aspiraation aikana ei kaikki verisolut ole aina näkyvissä; joissakin tilanteissa - esimerkiksi lymfoomassa - solut agglutinaatuvat luun trabekulaatioissa eikä sinusoideissa, joten niitä ei kerätä tai ne eivät näy luuytimen analyysissä.

Hinta missä

Moskovan ja Moskovan alueen luuytimen pistoskohdan keskimääräiset kustannukset ovat 500 Venäjän ruplaa. Myelogrammi - luuytimen punctate-tutkimus - maksaa noin 2500 ruplaa. Monien tutkimusten hinta riippuu tietystä yksityisestä klinikasta tai kunnallisesta sairaalasta. Siksi on suositeltavaa määrittää lopullinen hinta suoraan lääkärikeskuksessa.

Nykyaikaiset mahdollisuudet diagnosoida luuytimen vaurioita ei-Hodgkinin lymfoomissa trepanobioptate-aineella

Tekijät: E.V. Chigrinova, A.I. Pavlovskaya GU RCRC niitä. NN Blokhina RAMS, Moskova

Luuytimen (KM) osallistuminen perifeeriseen nehodkiini-lymfoomiin (NHL) on yksi tämän taudin ryhmän aikana tapahtuvista säännöllisistä vaiheista. NHL: n CM-tutkimuksen tärkeimmät merkinnät voidaan muotoilla seuraavasti:

lymfooman alkuvaiheen diagnoosin vaihe;
prosessin dynamiikan arviointi hoidon aikana;
arvio saadun remissioiden laadusta;
remissioiden täydellisyyden valvonta;
solukelpoisuuden arviointi KM.

NHL-luuytimen invaasio voidaan määrittää useilla diagnostisilla tasoilla valomikroskopiasta molekyylibiologisiin testeihin. Kaikilla tutkimustyypeillä on sekä melko selkeitä perusteita neoplastisten imusolmukkeiden tunnistamiselle että mahdollisuuksien objektiivisille rajoituksille. Kuten tiedetään, tutkittavaa KM-materiaalia on kaksi päätyyppiä: aspiraatti (natiivi solususpensio) ja trepanobioptat (osteomedullary-sylinteri). Luuytimen aspiraatti on solususpensio, joka mahdollistaa kvalitatiivisen kvantitatiivisen sytologisen tunnusmerkin hematopoieesin elementeille sekä tutkia minkä tahansa normaalin ja patologisen solupopulaation immunofenotyyppiä käyttäen virtaussytofluorimetriaa (PC). Trepanobiopsian tarkoitus on monimutkainen morfologinen tutkimus, joka mahdollistaa asianmukaisen hematopoieettisen aineiston lisäksi saada tietoa luun ja stromikudosten tilasta. Tämän julkaisun tavoitteena oli yrittää päästä käsiksi CM-oppimisen nykyaikaisten menetelmien olennaisuudesta trepanobioptat-tasolla.

Trepanobiopsy avulla voit arvioida tarkemmin CM: n rakennetta (lymfoidisen tunkeutumisen läsnäolo tai puuttuminen, sen jakautumisen luonne CM: ssa ja erityisesti lymfaattisen tunkeutumisen sijainti laminoidun luupalkin suhteen) sekä hematopoieesin tila yleensä, rasva- ja hematopoieettisten kudosten suhde jälkimmäisen solukkuus, karakterisoimaan CM: n ja luunpalkkien stroma, erityisesti retikuliinin ja kollageenikuitujen jakauma ja vakavuus, osteoblastien ja osteoklastien aktiivisuus, kasvualojen leveys ontelot jne. Lymfoomavaurion ekstramedullisen vaurion puuttuessa tai sen teknisesti mahdottomaksi, kun KM-aspiraatissa ei ole patologista lymfosytoosia, trepanobioptum KM voi olla ainoa diagnostisen materiaalin lähde. Syyt, jotka johtavat lymfoomasolujen puuttumiseen aspiraatissa, sisältävät äärimmäisen pienen määrän leukemisen kloonin soluja, skleroottisten muutosten vakavuutta lymfoomasoluissa ja myös adheesiomolekyylien (MA) lymfoomasolujen ilmentymistä, jotka toisaalta tarjoavat hemopoieettisen leviämisen. kudos ja stroma KM, ja toisaalta - määrittää solujen ja solujen välisten solujen välisten koskettimien vahvuus [1]. Adhesiinit, jotka tarjoavat tällaisia intratissulaarisia vuorovaikutuksia, kuuluvat kolmeen superfamiliaan: immunoglobuliinit - ICAM-1, CD54, integriinit - aL (CD11a / LFA-la), X (CD11c), 4 (CD49d / VLA-4), 1 (CD29), 2 (CD18), 3; sekä selektiinit - L-selektiini (CD62L), P-selektiini (CD62P). Tämä ei tietenkään ole koko lista MA: ista, jotka voivat määrittää NHL: n leviämisen tyypin elinpesifisellä tropismilla. Viime vuosien kirjallisuudessa tällaisten MA-tyyppien ilmentyminen liittyy kuitenkin CM: n osallistumiseen ja siihen sisältyvien lymfoomakeskusten arkkitehtuurin piirteisiin [2]. P. Lucio et ai. [3] kuvataan suhdetta CD11a: n, CD11c: n, CD18: n, CD29: n, CD44: n, CD49d: n, CD54: n, CD62L: n ilmentymisen ja NHL: n nosologisen variantin ja kurssin aggressiivisuuden välillä. Yksi heidän mielenkiintoisista havainnoistaan oli oletus, että NHL: n luokittelu sekä yksittäisten alatyyppien luokittelu kussakin nosologiassa on mahdollista MA-ilmentymisen immunologisen profiilin mukaan. E. Horst et ai. [4] antaa vertailevan arvion CD44-molekyylin ekspressiotasosta normaalin B- ja T-eron ja NHL: n eri vaiheiden aikana. Niiden tietojen mukaan CD44: n ilmentyminen vastaa lymfoomia, joilla on suuri leukemisaatioriski, ja tämän molekyylin ilmentymisaste kasvaa NHL: n etenemisen myötä. M. K. Angelopoulou et ai. [5] luonnehtivat myös MA-ilmentymän immunologista profiilia eri NHL-ryhmissä, mikä korostaa CD44: n ja CD56: n tärkeimpiä riskitekijöitä NHL: ssä.

Näin ollen on olemassa tekijöitä, jotka edistävät toisaalta NHL-leukemisaatiota, ja toisaalta ne voivat olla esteenä lymfoomasoluille tulla KM: n aspiraatiomateriaaliin. Näissä olosuhteissa trepanobioptat CM voi olla ainoa CM-kohde leukemisen substraatin tutkimuksessa.

On todettu, että suuremmalla taajuudella luuytimiin vaikuttaa matalan asteen B-solulymfoomat [6], jotka WHO: n hematopoieettisten ja lymfoidisten kudosten luokituksen [7] mukaan sisältävät kypsän pienen solutyypin lymfoomia:

pieni lymfosyyttilymfooma / B-solu krooninen imusolmuke;
vaipan solulymfooma;
solmun lymfooman marginaalivyöhyke;
ekstranodaalinen MALT-tyyppi ja pernan marginaalivyöhyke;
follikulaarinen lymfooma;
lymfoplasma-lymfooma.

Morfologinen analyysi

Trepanobioptata-tutkimuksen tehokkuus riippuu suurelta osin biopsian riittävyydestä. Joidenkin tutkijoiden mukaan jälkimmäisen tulisi olla 2 - 3 cm pitkä (vähintään vähintään 1,5 cm) ja sisältää vähintään 5 tai 6 sisäkkäistä onteloa [8, 9]. Tämä johtuu siitä, että CM: n solukkuus voi olla erilainen eri sisävammoissa. Sitä ei voida luotettavasti arvioida pienelle CM-fragmentille, erityisesti tapauksissa, joissa materiaalia edustaa subkortikaalinen vyöhyke, so. alue, joka sijaitsee kortikaalisen luun alla. Tämä vyöhyke on yleensä pieni solu, erityisesti vanhuksilla. Lisäksi mitä enemmän biopsiassa on lävitsejä, sitä suurempi on CM: n polttovikojen havaitsemisen todennäköisyys. Trepanobioptata-tutkimuksen menestys riippuu epäilemättä myös sen käsittelyn kaikkien vaiheiden riittävyydestä: histologisten osien kiinnittämisestä, kalkkiutumisesta, kaatamisesta ja valmistamisesta. Viime vuosina on pyritty parantamaan kussakin CM: n prosessointivaiheessa menetelmiä, jotka johtuvat ensisijaisesti immunohistokemiallisten menetelmien laajasta käyttöönotosta diagnostiseen prosessiin, erityisesti määrittämään lymfoidisen tunkeutumisen luonne ja luonne CM: ssä. Esimerkiksi on ehdotettu menetelmiä biopsiamateriaalin kaatamiseksi metakrylaattihartseihin ilman etukäteen kalkinpoistoa [10, 11]. Samalla kuitenkin korostetaan, että nämä menetelmät ovat liian kalliita ja aikaa vieviä, ja hyviä tuloksia, mukaan lukien immunohistokemiallinen tutkimus, voidaan saavuttaa noudattamalla tiukasti kaikkia standardin histologisen menetelmän sääntöjä ja vaatimuksia [11].

Trepanobiopsy KM: n tärkeimmät merkinnät ovat:

epäilty lymfooma;
lymfooman histotyypin luominen;
kasvainvaurion vaiheen määrittäminen kaikissa terapeuttisen ja diagnostisen prosessin vaiheissa;
hoidon tulosten seuranta remissioiden, osittaisen remission, kasvaimen toistumisen jne. havaitsemiseksi.

Lymfoidisen tunkeutumisen havaitseminen CM: ssa ei ole identtinen hänen lymfooma-leesioonsa. KM sisältää normaalisti lymfoidisoluja, jotka voivat muodostaa jopa 15–20% KM: n ytimien solujen koko populaatiosta. Nämä ovat kypsiä soluja ja T- ja B-imusolulinjojen progenitorisoluja. Kypsien solujen joukossa T-lymfosyytit ovat lukuisia, ja B-lineaariset solut hallitsevat progenitorisoluista. Lymfoidisolut voivat sijaita interstitiaalisesti hemopoieesielementtien välillä, ja ne voivat olla pieniä klustereita - imusolmukkeita. Lymfoidisolujen määrän kasvu voi olla sekä absoluuttinen että suhteellinen hematopoieesin vähenemisen vuoksi, esimerkiksi hypoplastisissa olosuhteissa. Hyvänlaatuisia imusolmukkeita löytyy mistä tahansa KM: stä, vaikka niitä esiintyy useammin iäkkäillä ihmisillä, naisilla, joissakin hematologisissa ja ei-hematologisissa sairauksissa, esimerkiksi reumatoidisissa sairauksissa [8], sytomegalovirusinfektion, toksoplasmoosin, tarttuvan mononukleoosin ja muiden tapauksissa infektiot, verensiirron jälkeinen oireyhtymä [12-14] jne.

Neljä hyvänlaatuisten imusolmukkeiden tyyppiä on kuvattu [15, 16]: ensimmäinen - perinnöllisen keskuksen kanssa; toinen - selvillä rajoilla; kolmas - epäsäännölliset epätasaiset ääriviivat; neljäs - pienten lymfoidisolujen klustereiden muodossa. Lymfoidisolujen lisäksi ne sisältävät tavallisesti plasman soluja, histososyyttejä, kapillaareja, joskus eosinofiilejä ja mastosoluja sekä tarjouskilpailun reticulin-verkkoa. Ne voivat olla useita, sijaitsevat yleensä intertrabekulaarisena. Tasaisen minimaalisen lymfooman tunkeutumisen havaitseminen on tiedossa kasvain yleistymisen indikaattorina ja siksi se voi olla tärkeä ennusteen ja hoidon suunnittelun kannalta [17]. Siksi lymfoidisen tunkeutumisen luonteen selventäminen, hyvänlaatuisen luonteen lymfoidisen tunkeutumisen ja CM: n lymfoomavaurion välinen diagnoosi ovat äärimmäisen tärkeitä, mutta samalla yksi vaikeimmista ja ei aina ratkaise histologista tutkimusta, mutta ne edellyttävät immunohistokemiallista, molekyylibiologista, geneettistä menetelmiä.

Tärkeimmät histologiset kriteerit, joita käytetään lymfooma-CM-vaurion ja hyvänlaatuisen lymfoidin tunkeutumisen differentiaalidiagnoosissa sekä lymfooman alaluokkauksessa CM: ssa, ovat ensinnäkin lymfoidisuodatuksen topografiset piirteet ja toiseksi infiltraatiosolujen morfologiset (ydin-sytoplasmiset) ominaisuudet.

Lymfoidikasvaininfiltraation lokalisoitumista luuytimessä on kolme: interstitiaalinen, polttoväli ja diffuusio [8] (kuva 1).

Kuva 1. Kaavamainen esitys NHL: n tappion KM-tyypeistä [8]

Interstitiaalisessa tyypissä lymfoidisolut sijaitsevat CM-solujen välissä häiritsemättä sen normaalia arkkitehtuuria ja hematopoeesia (kuvio 2).

Kuvio 2. B-CLL: n vaurion interstitiaalinen tyyppi. Värjätään hematoksyliinillä ja eosiinilla, HC. 250

Hajotetulla tyypillä havaitaan massiivinen imusolmuke, joka täyttää kaikki tai lähes kaikki interglobe-tilan rasvan ja hematopoieettisten kudosten terävän vähenemisen tai täydellisen korvaamisen. Limakalvon infiltraatiokeskeiselle tyypille on tunnusomaista polttimien läsnäolo, useimmiten useat. Lapsuus voi sijaita intertrabekulaarisessa ja / tai paratrabekulaarisessa. Paratrabekulaarinen lokalisointi voi olla eri leveyksiä ja pituuksia sisältävän lymfoidisolujen kerros, joka on tiiviisti vieressä trabekulaattien kanssa ja joissa on stromiseen skleroosiin liittyviä merkkejä tai luun trabekulassa oleva leveä pohja (kuvio 3).

Kuva 3 Kasvaininfiltraation paratrabekulaarinen kasvu follikulaariseen lymfoomaan. Värjätään hematoksyliinillä ja eosiinilla, HC. 200

Lymfoidikasvaimen tunkeutuminen voi sijaita interstitiaalisen ontelon keskiosissa, so. intertrabecular. Ne voivat olla solmun muodossa (kuvio 4), jossa on keskellä (useammin ilman sitä) lisääntymiskykyä tai leesio, jossa on epäsäännölliset, huonosti muotoillut rajat.

Kuva 4. CM: n fokaalivaurio marginaalivyöhykkeen lymfoomassa. Värjätään hematoksyliinillä ja eosiinilla, HC. 200.

Suuri vaurio voi olla lähellä lyhyttä etäisyyttä trabekulaatioihin, mutta tämäntyyppinen lymfooman tarkennuksen paikallistaminen ei ole paratakulaarinen. Interstitiaalisen tunkeutumisen tyypin vaihtelu on kasvainsolujen intrasinusoidinen lokalisointi (kuvio 5) [8, 18].

Kuva 5. Kasvaimen lymfosyyttien intrasinusoidinen sijainti. Immunohistokemia, värjäys CD20: ssa

Eräs toinen lymfooma-infiltraatiotyyppi KM kuvataan - yksi solun dispersio, jossa yksittäisten lymfoomasolujen läsnäolo hematopoieesin elementtien joukossa on minimaalisesti ilmentynyt interstitiaalinen tyyppi, jossa on eri tyyppisiä lymfoidisuodatuksia, jotka muodostavat sekatyypin. Esimerkiksi interstitiaalinen diffuusio, interstitiaalinen nodulaarinen, interstitiaalinen intrasinusoidinen [8, 11]. Ottaen huomioon lymfooman tunkeutumisen topografian, kasvainsolujen morfologiset (ydin-sytoplasmiset) ominaisuudet ja myelofibroosin merkkien esiintymisen tai puuttumisen kärsineillä alueilla, on kehitetty algoritmi lymfoomien alaluokitteluun CM: ssa. Vain paratrabekulaarisen lymfooman tunkeutumisen läsnäolo sallii epäilemättä puhua follikulaarisesta lymfoomasta. Follikulaarista lymfoomaa on myös tunnusomaista sekatyyppinen tunkeutuminen, mukaan lukien bakteerien väliset fokukset, mutta paratrabekulaarisen lokalisoinnin välttämätön läsnäolo. Lymfoomasolujen interstitiaalinen kasvu on hyvin harvinaista, ja diffuusiotyyppiä ei ole lähes löydetty. Infiltraatit koostuvat pääasiassa soluista, jotka ovat samankaltaisia kuin eri kokoisten keskiosien, sentroblastityyppisten yksittäisten solujen kanssa. Vallitseva solujen koostumus CM: ssä on tyypin 1 follikulaarinen lymfooma. Usein imusolmukkeessa oleva follikulaarinen lymfooma ei osu solukompositioon CM: ssä havaitun kuvan kanssa. Tätä ilmiötä kutsutaan ristiriitaiseksi. Tyypillinen follikkelilymfooman piirre CM: ssä on myelofibroosi, jota havaitaan lymfoomasairauksien alueilla ilman merkkejä CM: n normaalin arkkitehtuurin häiriöistä.

Manttivyöhykkeen ja lymfoplasmacytic-lymfooman lymfoomassa voi esiintyä pieniä paratrabekulaarisen infiltraation polttimia, mutta ne voivat sulkea pois lymfooman pienistä lymfosyyteistä / B-kroonisesta lymfosyyttisestä leukemiasta. Manttivyöhykkeen lymfoomalle tyypillisiä ovat lymfoomasolujen interstitiaaliset ja polttoväliset kasvutyypit [19]. Jälkimmäiset ovat seos, jossa on homogeenisia pieniä ja keskisuuria soluja, joissa on epäsäännölliset ydinkalvon reunat. Joskus soluilla on centrokytoidimorfologia, joka voi lisätä samankaltaisuutta follikulaarisen lymfooman kanssa. Suuria soluja, joilla on sentriflasti- tai immunoblastien rakenne, ei kuitenkaan löydy. Histoosyyttien läsnäolo, jossa on kirkas sytoplasma ilman fagosytoosin merkkejä, on mahdollinen. Myelofibroosi ei ole ominaista. Lymfoplasmakyyttisen lymfooman kohdalla ovat tyypillisiä kasvainsolujen interstitiaaliset, fokusoidut interstitiaaliset ja diffuusit kasvutyypit. Paratrabekulaarinen lokalisointi tapahtuu, mutta erittäin harvoin [18]. Yksittäisen lymfooman läsnäoloon perustuvan lymfoplasmosyyttisen lymfooman diagnoosi on mahdotonta. Ratkaisevaa roolia on solun koostumuksen yksityiskohtainen karakterisointi, jota edustavat solut, kuten pienet lymfosyytit, plasman ja lymfoplasmatiotidisolut, sekä pieni määrä immunoblasteja, plasmablasteja. Usein on myelofibroosi, polttoväli tai diffuusio, häiritsemättä normaalia arkkitehtuuria [14].

Interstitsiaalisen ja / tai diffuusisen tunkeutumisen tyypin kanssa, jossa on tai ei ole polttimonmuodostusta, on ensinnäkin epäilty lymfooma pienistä lymfosyyteistä / B-solujen kroonisesta lymfosyyttisestä leukemiasta. Pseudofollikkelien läsnäolo tapauksissa, joissa on pääasiassa diffuusi kasvainkasvua, infiltraation solujen koostumuksen piirteet (pienet lymfosyytit, joissa on pyöristetty ydin, kertakäyttöinen kromatiini) mahdollistavat lymfooman väitetyn histotyypin vahvistamisen. Pienistä lymfosyyteistä / B-kroonisesta lymfosyyttisestä leukemiasta johtuva myelofibroosi ei ole tyypillistä.

Pernan marginaalivyöhykkeen lymfooma, jossa on tai ei ole kiertäviä verisuonten lymfosyyttejä, on tunnusomaista CM: n tuumorisolujen polttoväliselle bakteerien väliselle tai diffuusiselle tunkeutumiselle. Lymfoomasolujen lokalisoitumista luuytimen sinusiinissa pidetään ominaispiirteinä [20–22]. Tämäntyyppinen tunkeutuminen voi tapahtua muilla lymfoomityypeillä [18], mutta sen hallinnan tapauksessa pernan marginaalivyöhykkeen lymfooman diagnoosi voidaan tehdä suurella todennäköisyydellä. Solmu- ja ekstranodaalisen MALT-tyypin marginaalivyöhykkeen lymfooma liittyy harvoin CM: hen, mutta sen tappion sattuessa tapahtuu interstitsiaalinen polttotyyppi. Suurikokoiset sivuvaikutukset voivat liittyä luun trabekulaatioihin, jotkut leesiot voivat muistuttaa lymfoidia follikkelia, niissä on jalostuskeskuksia ja laaja marginaalivyöhyke, joka koostuu soluista, joissa on monosytoidimorfologiaa. Solukoostumuksessa on pieniä ja keskikokoisia lymfoidisoluja, joissa on pyöristetyt ytimet, kohtalainen leveys kirkkaassa sytoplasmassa sekä erilainen määrä plasmasoluja, pieni määrä aktivoituja lymfoidisoluja. Perifeerisen ei-Hodgkin B-solu-lymfoomien - diffuusi suurisoluisten lymfoomien ja Burkittin lymfooman - aggressiivisia muunnoksia leimaa pääosin kasvainsolujen diffuusiotyyppi CM: ssa.

CM: n tappio perifeerisissä T-solulymfoomisissa on harvinaisempi kuin perifeerisessä B-solussa [23]. Perifeeriset T-solulymfoomat histotyypit ovat:

määrittelemätön;
angioimmunoblastic;
anaplastinen suuri solu ja ihon T-solulymfooma.

KM-leesioiden taajuus perifeerisissä T-solulymfoomas- sa on hyvin vaihteleva, samoin kuin lymfoomasubstraatin lokalisoinnin tyypit. Perifeeristen T-solu-lymfoomien piirteisiin kuuluvat niiden kyky aiheuttaa merkittäviä sekundaarisia muutoksia verisuonten proliferaation, granulomatoottisen reaktion, eosinofilian, myelofibroosin jne. Muodossa. Yksi tärkeimmistä ongelmista KM-leesioiden todentamisessa perifeerisissä T-solulymfoomassa on differentiaalidiagnoosi reaktiivisilla T-solujen proliferaateilla, joita esiintyy kasvainsairauksien, kuten pienisoluisten B-solukasvaimien, klassisen Hodgkin-lymfooman, Hodgkinin lymfooman nodulaarisen lymfoidin, myelo-dysplastisen., diffuusi suuri B-solulymfooma, joka sisältää runsaasti T-soluja ja / tai histososyyttejä, samoin kuin ei-kasvainten tiloissa: autoimmuunisairaudet kuten nivelreuma ja polymyalgia, useita virus- ja bakteeri-infektioita jne. [23].

Histologisen tiedon tulkinta ei ole aina helppoa, ja histologiseen tutkimukseen perustuva oikea diagnoosi on useimmissa tapauksissa mahdotonta. Histopatologin ja hematologin välinen tiivis yhteistyö on välttämätöntä, sillä tarvitaan laajasti muita tutkimusmenetelmiä, kuten immunofenotyyppiä ja joissakin tapauksissa molekyylibiologista ja geneettistä analyysiä.

immunofenotyypitystä

Trepanobioptum CM (osteomedullary-sylinteri) on heterogeeninen materiaalitiheys: luun komponentti on tiheä aine, hematopoieettinen kudos on löysä puolijäähdytteinen aine. Immunologisten reaktioiden suorittamiseksi on välttämätöntä valmistaa ultrathin osia, jotka vaativat kaikkien histologisten komponenttien saattamista tasaiseksi. Tämä voidaan saavuttaa joko pehmentämällä luurakenteita tai tiivistämällä hematopoieettinen kudos itse. Ensimmäisessä tapauksessa suoritetaan luun kalkinpoisto, toinen vaikutus saadaan aikaan kaatamalla materiaali metakrylaattihartseihin perustuviin liuoksiin tai jäädyttämällä alhaisissa lämpötiloissa (-700 ° C) erityisseoksissa, ja molemmat menetelmät eivät vaadi kalkinpoistoprosessia [24, 25]. Trepanobiopaattien materiaalin jäädyttäminen on ihanteellinen antigeenisten determinanttien säilyttämiseksi, kun taas metakrylaattihartsien käyttö mahdollistaa erinomaisen laadukkaiden histologisten valmisteiden saamisen [10, 11]. Tällä hetkellä, kuten jo todettiin, kalkinpoistomenetelmää käytetään yleisimmin rutiinikäytännössä, minkä jälkeen materiaali kaadetaan parafiiniin. Menetelmän valinta tapahtui historiallisen valinnan seurauksena ottaen huomioon taloudellinen toteutettavuus ja tekninen saatavuus.

Riippumatta materiaalin täyttämiseksi käytetystä histologisesta protokollasta materiaalin immunologinen värjäys suoritetaan yhden periaatteen mukaisesti, joka perustuu kiinnostuksen kohteena olevan antigeenin reaktioon - monoklonaaliseen vasta-aineeseen. Trepanobioptaan histologisen valmistuksen tyyppi voi vaikuttaa vain sellaisen väriaineen tyyppiin, jolla morfologi voi lukea positiivisen reaktion. Siten kryostaattien leikkausten osalta fluoresoivien väriaineiden käyttö on parafiini- tai metakrylaattihartseihin upotettua materiaalia varten optimaalista, kromogeenit ovat näkyvissä valomikroskopian tasolla. Immunologisten menetelmien kehittyminen CM: n trepanobioptaattien materiaalin tutkimiseksi on johtanut siihen, että CM: n parafiiniosissa on valittu immunoentsymaattinen menetelmä (immunohistokemia - IHC). Selkeyden vuoksi voit vertailla kaikkia värjäysmenetelmiä (katso taulukko).

Pöytä. Eri värjäysmenetelmien vertailu riippuen materiaalin trepanobiopta KM: n käsittelyprotokollasta

Venäjän syövän tieteellisen keskuksen hemopoieesi-immunologian laboratoriossa kaikki esitetyt menetelmät testattiin. Edullisia ovat IHH yhdistettynä immunofluoresenssiin parafiiniosissa [26, 27]. On ilmeistä, että CM: n trepanobioptaattien immunofenotyypitys on teknisesti vaikeaa ja taloudellisesti kallista prosessia ja vaatii siksi selkeästi muotoiltuja käyttöohjeita.

Yleensä NHL: ssä CM: n immunofenotyyppien tärkeimmät tehtävät ovat:

neoplastisen lymfoidin tunkeutumisen havaitseminen;
erilaisten lymfoomien differentiaalidiagnoosi;
erotusdiagnoosi reaktiivisilla prosesseilla.

Tehtävien ratkaisussa etusijalle tulisi tietenkin antaa KM-aspiraatin moderni virtaussytofluorimetria. Indikaatiot immunohistokemiallisista tutkimuksista trepanobioptates KM NHL: ssä ovat vieläkin kapeampia. Tutkimus on tehtävä:

kun CM: n patologinen imusuodatus havaitaan ja aspiroidun virtaussytofluorimetrian mahdollisuutta ei ole;
jos imusolussa on huomattavia soluja, tai lymfoomien lymfosyyttien kokonaismäärä on pieni prosenttiosuus, jolle on tunnusomaista KM-leesion korkea taajuus;
osana kokonaisvaltaista tutkimusta CM: stä CD5-negatiivisilla muunnoksilla (follikulaarinen, kaikki marginaalivyöhykkeen lymfoomien variantit);
reaktiivisen ja kasvaimen plasmakytoosin differentiaalidiagnoosille, jossa on pieni prosenttiosuus plasman soluista aspiraatiossa;
kaikissa tapauksissa, jos vain aine on havaittu lymfoidisen tunkeutumisen trepanobioptate KM: ssä, joka on epäilyttävä tuumorille.

T-solun NHL: ssä on edullista antaa myös QC, koska antigeenien samanaikainen ilmentäminen katsotaan diagnostiseksi useimmille lymfoomille. Lisäksi on vaikeuksia käyttää vasta-aineita a- ja A-T-solureseptoreihin, jotka määrittävät neoplastisten T-lymfosyyttien klonaalisuuden CM: n parafiiniosissa. Integroitu immunomorfologinen tutkimus kaikesta T-lineaarisesta NHL: sta peräisin olevasta trepanobioptaatista vaatii anaplastisen suuren solulymfooman (ACL), koska se erottuu erityisellä luuytimen invaasiona - yksittäisten solujen monodispersion muodossa hematopoieesin elementtien välillä, joka voidaan määrittää vain immunohistokemiallisesti. Maailman tietojen mukaan tämän variantin leukemisaation prosenttiosuus on noin 30, kun taas KM-aspiraatin tutkimus ei yleensä ole informatiivinen [28-30]. Esimerkiksi A.I. Sluginaa [31], joka on omistettu lapsille suurisoluisten lymfoomien hoitoon, ei havaittu yhdessä KM: n aspiraatista kahdesta CM-vaurion pisteestä yhdellä 18 lapsesta, joilla oli AKL-diagnoosi, joka perustui solmujen ja ekstranodaalisten vaurioiden morfoimmunofenotyypin perusteella.

M. Fraga et ai. [32] biopsianäytteiden rutiininomaisessa histologisessa tutkimuksessa CM havaitsi vahinkoa vain 17%: lla potilaista ja lisämunohydrokemiallisen värjäyksen aikana käyttäen monoklonaalisia vasta-aineita CD30: een ja epiteelimembraaniantigeeniin (EMA) - 23%: lla potilaista. Kaikissa 42 työssä mukana olleessa tapauksessa esiintyi yksittäisten kasvainelementtien hajoamista normaalien hematopoieettisten solujen ja adiposyyttien välillä. Samanlaisia AKL: n luuytimen invaasion histologisia piirteitä kuvataan myös Y. Sadahiran et ai. [16] ja C. Bayle et ai. [33].

B-NHL: n osalta CM: n trephine-biopsianäytteiden immunofenotyyppien objektiivinen diagnostinen arvo ei ole sama eri varianttien osalta, joten menetelmän päädiagnostiikkaominaisuudet voidaan esittää selkeämmin nosologioiden mukaisesti. Esimerkiksi B-solulymfosyyttisen leukemian / pienen lymfosyyttilymfooman (B-CLL / LML) ja karvaisen solulymfosyyttisen leukemian lisäksi niillä on voimakas leukemisaatiopotentiaali (> 90%), mikä heijastuu patologisen lymfosytoosin vakaan ulkonäön CM-aspiraatissa [7, 8, 14]. Kattavaa immunomorfologista tutkimusta aspiraatista PC: llä voidaan pitää perustavanlaatuisena, koska vain PC: llä voidaan käyttää kaksois- ja kolminkertaista fluoresoivaa merkintää diagnostisen markkerin koekspression arvioimiseksi: CD23 ja CD5 B-CLL / LML: llä ja CD103: lla ja CD25: llä CD: n + lymfosyyttien pinnalla [34, 35].

Trepanobiopsian tarve, jossa on täydellinen leukeminen kuva perifeerisestä verestä ja aspiraatista CM: stä, ei ole täysin selvä. Jos jotkut kirjoittajat vaativat aikaisempien vuosien kirjallisuudessa kirjallisesti B-CLL: n erilaisten CM-tunkeutumismuotojen ennustavaa arvoa [36, 37], toiset myöhemmin kumovat sen [38, 39]. Tämän jälkeen tunnistettiin kasvaimen biologisen aggressiivisuuden luotettavampia merkkejä, kuten somaattisten hypermutaatioiden esiintyminen geeneissä, jotka koodaavat raskaiden ketjujen vaihtelevia alueita, CD38-molekyylin ilmentymistä ja korkean p 2-mikroglobuliinin tason [40, 41].

Mantelisolulymfooma (LKM)

CM: n tappio LKM: llä tapahtuu noin 75–80%: lla potilaista [42–48], ja toisin kuin B-CLL: ssä, perifeerisen veren leukeminen vaihe löytyy vain 50%: lla potilaista. P. L. Cohen et ai. [49] kuvaili suurinta prosenttiosuutta (93) CM-vauriosta vaipan vyöhykkeen lymfooma 46 potilaan aineistossa. Kirjoittajat selittivät tämän tuloksen tutkimalla kaikkien potilaiden tiukasti kahdenvälisen trepanobiopsian materiaalia. Ensisijainen menetelmä leukemisen kloonin immunofenotyypin määrittämiseksi tässä nosologiassa tulisi pitää PC-aspiraattina, joka sallii CD5-antigeenin määrittämisen klonaalisilla B-lymfosyyteillä ja CD20-molekyylin ekspressiotason. Tähän lymfoomaan on kuitenkin kertynyt tarpeeksi tapauksia, joissa on poikkeava immunologisten markkereiden ilmentymisprofiili: ilman CD5: n ilmentymistä CD23: n positiivisella ilmentämisellä [50], CD5: n ja CD23: n rinnakkaisekspressiolla [51], CD5: llä ja CD10: llä [42, 44], CD10: llä ilman CD5: ää [52] Lisäksi lymfooman pääasiallinen pathognomoninen merkki WHO-luokituksen (2001) mukaan on sykliinin D1 yli-ilmentyminen, joka liittyy translokaatioon (11; 14) ja joka vaikuttaa immunoglobuliinien raskaita ketjuja koodaavien geenien lokuihin kromosomissa 14 ja bcl-lokuksessa 1 (sykliini D1) x: llä omosome 11 [53-57]. Uskotaan, että tällä geneettisellä tapahtumalla on merkittävä rooli vaipan vyöhykkeen lymfooman kehittymisen patogeneesissä, koska sykliini D1: n (proteiinin - solusyklin säätäjän) yli-ilmentyminen estää solun G1-vaiheensiirron rajalla? S. Cyclin D1 viittaa proteiineihin, jotka ekspressoidaan ydinkalvolla, joten ainoa tapa määrittää se on tällä hetkellä immunohistokemian menetelmä [58] (kuvio 6).

Kuva 6. Sykliini Dl: n ydinteknologinen ilmentyminen luuytimen substraatti-lymfoomasoluilla manttisoluista. Immunohistokemia, SW. 250

Siten voidaan sanoa, että leukemisen kloonin immunofenotyypin ensisijainen määritys LMC: n kanssa on sopivin PC: n käytön yhteydessä, mutta diagnoosin lopullinen tunnistaminen edellyttää trepanobioptate CM: n immunohistokemiallista tutkimusta.

Follikulaarinen lymfooma (FL)

Tilastotietojen mukaan QM: n osallistuminen PL: hen määritetään 40–60%: ssa tapauksista [59, 60], ja kasvainsolujen verenkierto perifeerisessä veressä määritetään alle kolmannes potilaista [8].

PL: lle ominaiset QM: n skleroottien muutosten vakavuus ja todennäköisesti myös adheesiomolekyylien ilmentymisprofiili estävät usein neoplastisia soluja pääsemästä aspiraattiin [61–63], joten biopsian histologiaa voidaan pitää KM-tutkimuksen tärkeimpänä menetelmänä tunnetun immunofenotyypin kanssa. "Kultaisen diagnostisen standardin" olemassaolo lymfooma-substraatin lokalisoinnissa PL-paratrabekulyarnogo-lokeroinnissa, jossa on sentosyytti-sentroblastikoostumus, sallii morfologin rajoittaa standarditutkimuksen KM ilman immunohistokemiallista värjäystä.

PL: ssä suoritettava immunohistokemiallinen tutkimus on välttämätöntä CM: n vähäisimmän tunkeutumisen määrittämiseksi arvioidessaan remission täydellisyyttä [64]. Kuitenkin pienellä määrällä B-soluja niiden luonteen arviointi on jo yli IHC: n ominaisuuksien ja se voidaan suorittaa vain immunoglobuliinigeenien kloonisen uudelleenjärjestelyn tai patognomonisen translokaation t (14; 18) määritelmän perusteella.

Marginaalinen lymfooma (LMZ)

WHO: n luokittelussa (2001) erotellaan lymfoidisten follikkelien tai periarterioolisten lymfoidikytkentöjen marginaalisen vaipavyöhykkeen soluista peräisin olevat 3 päätyyppiä lymfoomia. Nämä ovat LMZ: n pernasta, LMZ: n solmu- versiosta sekä limakalvoihin liittyvästä variantista (MALT).

Pernan LMZ: ssä eri lähteiden mukaan CM-vauriot ovat yleisimpiä 67–100%: ssa tapauksista [65–68], MALT-lymfoomia noin 20%: ssa [65, 69, 70]. CM: n osallistuminen solmukohtaisuuteen katsotaan casuistryksi, joka voidaan kuitenkin selittää itse nosologian harvinaisuudella [12, 71, 72]. Immunofenotyyppivaiheessa LMZ: n diagnoosi todetaan todennäköisemmin eliminaatiomenetelmällä, koska tyypillisiä immunologisia markkeriliitoksia ei ole määritelty. Pan-B-lineaaristen antigeenien ilmentyminen on ominaista CD5-, CD23-, CD10-molekyylien [1, 73–77] rinnakkaisilmentymisen puuttuessa. Erotusdiagnoosille LMZ-ryhmässä voi olla hyödyllistä ottaa huomioon joitakin eroja pinnan immunoglobuliinien ilmentymisessä. Niinpä pernan LMZ: lle on ominaista IgM +: n, IgD + -molekyylien samanaikainen ilmentyminen, kun taas solmu- variantin tapauksessa läsnä on vain IgM-molekyylejä ilman IgD-proteiinia [7, 78]. Tässä artikkelissa haluan keskittyä pernan varianttiin LMZ, jolla on suurin tropismi hematopoieettiselle kudokselle. On huomattava, että monilla pernan LMZ-potilailla on objektiivisia vaikeuksia splenektomiassa, joten diagnostinen taakka putoaa usein lymfooman käytettävissä olevaan leukemiseen substraattiin.

KM: n aspiraatin patologinen lymfosytoosi pernan LMZ: ssä mahdollistaa lymfoomaelementtien fenotyypin tutkimisen sytometrisesti ja sytogeneettisesti [8, 79]. Koska tällä lymfoomalla ei ole riittävän tyypillisiä immunologisia ja sytogeneettisiä merkkejä (kromosomin 7 deleetio tapahtuu alle 40%: ssa tapauksista, kromosomin 3 trisomiikka on alle 17%), mikä tahansa lisädiagnostiikka-informaatio on hyödyllinen diagnoosin vahvistamiseksi, esimerkiksi määrittäen tietyntyyppisen kasvun. lymfoomat trepanobioptate CM: ssa (WHO). LMZ-pernoille on kuvattu kaksi patologista kasvutyyppiä - intrasinusoidiset ja nodulaariset [8, 14]. Ensimmäisessä tyypissä kasvain ”makeisten” määrittäminen mikrovaskulaarisen astian säiliöiden sisällä ei ole aina mahdollista tutkittaessa trepanobiopattien KM-standardin värjättyjä osia - vain kun käytetään immunohistokemiallista värjäystä käyttäen monoklonaalisia vasta-aineita pan-B-solumarkkereihin (kuvio 7) [27].

Kuva 7. ”Makeuttavien” kasvainsolujen intrasinusoidinen lokalisointi pernan LMZ: ssä. Immunohistokemia, väri CD20, SW. 200

Patologiset lymfosyytit, jotka on värjätty ruskean kromogeenin (DAB) avulla, muodostavat lineaarisia rakenteita pitkin CM-salmissa tukkeutuneita poskioita (ns. Mikroväliä), ja nodulaarisen tyypin katsotaan olevan toiseksi yleisin pernan LMZ: ssä. Sitä erottaa interstitiaalinen sijainti, jäännösmuodostuskeskusten säilyttäminen (vaihteleva ominaisuus) ja selvä vyöhyke [8, 14, 80]. Mainittu yhdistys morfologisia ominaisuuksia määritellään samankaltaisuus patologinen kyhmyjä kanssa reaktiivisen imukeräsissä joten ilmeisesti suorittamalla immunohistokemiallinen tutkimukset trepanobioptate CM nimellä solmukohtien tyyppi lymfooma tunkeutumisen LMZ perna tarvitaan myös, ja tutkimuksessa, lisäksi erotusdiagnoosissa muiden suoritusmuotojen perifeeristen B-solujen pienisoluinen lymfooma sisältää lymfaattisen tunkeutumisen reaktiivisen luonteen poissulkemisen. Lisäesimerkki lymfooman infiltraattien neoplastisesta luonteesta on sellaisten follikulaaristen dendriittisolujen verkoston muodostuminen, jotka ovat positiivisia CD21: lle, CD23: lle ja CD35: lle, joka ei ole tyypillistä muiden B-NHL-varianttien, kuten myös reaktiivisten solmujen, infiltraatioille (kuvio 8) [14, 80, 81].

Kuva 8. follikulaaristen dendriittisolujen verkko lymfoomasoluissa LISS: llä. Immunohistokemia, väri CD21: llä

MALTin leukemointi, kuten jo on raportoitu, on varsin harvinaista [65, 69, 70]. Näissä lymfoomissa voidaan kuitenkin havaita riittävän tiheät T-solureaktiiviset imusolmukkeet. Näiden infiltraattien luonteen määrittäminen lukuun ottamatta tiettyä KM-leesiota, joka on perusteltua oikean asettelun aikaansaamiseksi MALT: n kanssa, on myös mahdollista vain immunofenotyypin avulla [82].

Plasman solu B-NHL

CM: n trefiinibiopsia-näytteiden immunohistokemia näyttää olevan merkittävä differentiaalidiagnostiikkatesti, jossa CM-aspiraatissa on pieni prosenttiosuus plasman soluista potilailla, joilla on paraproteinemia ja jolla on epäilty alkuperäinen multippeli myelooma (MM) tai minimaalisen jäännössairauden kontrollointi hoidetuilla potilailla. Immunofermentaalisten ja immunofluoresenssimenetelmien yhdistelmä CM: n trepanobiopaattien materiaalilla (kuvio 9) [27, 83] voidaan pitää optimaalisena informatiivisuuden kannalta. Immunohistokemian avulla voit määrittää plasman solujen lukumäärän, sijainnin ja sytologiset ominaisuudet. Kaksinkertaisen fluoresoivan leimatun vasta-aineen käyttö immunoglobuliinin kevyille ketjuille? ja? voit määrittää mono- tai polyklonaaliset plasmasolut yhdessä näkökentässä.

Kuva 9. Reaktiivinen plasmakytoosi. ja - immunohistokemialliset värit CD138: ssa (syndekaani-1); b - immunofluoresenssivärjäys yhdistetyllä leimatulla vasta-aineella? (vihreä hehku) /? (keltainen hehku)

Kuviossa 1 9, ja on selvästi nähtävissä, että ruskean kromogeenin kanssa värjätyt plasman solut ovat kypsiä, niillä ei ole ydinvoimaa ja ne sijaitsevat perikapillaarissa (sinus-pitkin). Kaikki merkit ovat tyypillisimpiä reaktiiviselle plasmakytoosille. Kuviossa 1 9b - fluoresoivan mikroskoopin pimeässä kentässä immunoglobuliinien a- ja p-ketjuja kuljettavien plasmasolujen suhde on suunnilleen sama (a +: n ylivalta on pieni), ts. solut eivät ole kloonisia. Usean myelooman diagnoosi on suljettu pois.

Aggressiivinen B-NHL: diffuusio B-solujen suuri solulymfooma (DL) ja Burkittin lymfooma (LB)

CM-vaurion määritelmä näissä muunnelmissa, joilla on tyypillinen morfologia, näyttää olevan melko yksinkertainen ja silloin, kun tunnetun immunofenotyypin tyyppi on extramedullary komponentti, sitä voidaan rajoittaa vain morfologisella tutkimuksella trefiinibiopsia-aineesta tai CM-aspiraatista. Erityisen mielenkiintoista on tutkimus, jossa selvitetään epäsäännöllisiä pienisoluisia imusoluja CM: ssä useilla B-NHL: llä, erityisesti DL: llä ja LB: llä. Nykyaikaisessa kirjallisuudessa DLBL: n kanssa esiintyvien epäsuotuisien histologisten tilanteiden ilmiötä käsitellään melko harvoin. Yhteenvetona kaikista saatavilla olevista kirjallisista materiaaleista voidaan tunnistaa kolme keskeistä syytä ristiriitaisuuksiin [17, 84]:

transformaatio aggressiivisemmaksi variantiksi (suuri solu NHL). Tyypillisin FL: lle ja B-CLL: lle (Richterin oireyhtymä) ja on kasvain etenemisen morfologinen ilmentymä;
reaktiivinen prosessi. Pienien solujen infiltraatioissa CM: ssa, toisin kuin extramedullary DCL: llä, on T-solu luonne, jossa on erilainen suhde CD4 + / CD8 + -populaatioita;
todellinen kaksoisuus. Kahden lymfoproliferatiivisen prosessin samanaikaista rinnakkaiseloa, joilla on erilaiset immunomorfologiset ja molekyylibiologiset klonaaliset ominaisuudet. Tällaisia primaarisia prosesseja kutsutaan myös komposiitiksi.

RCRC RAMS: n hemopoieesin laboratoriossa tehdyssä työssä DVCL: n potilaiden (20 potilasta) epäjohdonmukaisilla lymfoidisilla pienisoluisilla infiltraatioilla tehdyssä immunologisessa tutkimuksessa saatiin varsin mielenkiintoisia tuloksia. Kaikissa tapauksissa lymfoidiset infiltraatiot näyttivät edustavan reaktiivisia T-soluja. Joissakin tapauksissa immunohistokemiallinen tutkimus T-komponentin joukosta identifioi suuria B-soluja, joilla oli ilmeisiä atypia-merkkejä, samankaltaisia kuin sentroblastit ja immunoblastit, joita pidettiin DCL: n luuytimen hyökkäyksen alkumerkkeinä. Näissä tapauksissa CM: n immunologinen kuva vastasi DLT-varianttia, joka oli runsaasti T-soluissa (kuvio 10), kun taas kaikilla potilailla ekstramedullaarinen tuumori oli klassisen DLBL: n ulkonäkö.

Kuva 10. Epäsäännöllisen pienisoluisen lymfoidin tunkeutumisen IHH: n potilaalle, jolla on extranodaalinen DLBC. a - CD3: n värjäys (T-solukomponentti); b - värjäys CD20: lla (suuret erilliset anaplastiset B-solut)

Tutkittujen ryhmien kliinistä kulkua koskevan kattavan analyysin perusteella todettiin, että T-soluklustereiden muodostumisen taipumus esiintyi pääasiassa potilailla, joilla on ensisijainen extranodaalinen lokalisointi DLBC: ssä. Potilailla, joilla on CM: n primaariset solmu- muodot, havaittiin tyypillinen DCL: n extramedullary-komponenttia vastaava hajakuormitusfiltraatio, ja T-solun reaktiivista komponenttia edusti muutama eristetty solu (kuvio 11).

Kuva 11. Immunohistokemiallinen tutkimus leukemisesta substraatista KM ensisijaisessa solmu DCL: ssä. ja - värjäys D20: ssa: suuren solun rakenteen kasvain diffuusikas kasvu; b - CD3: n värjäys: hajallaan muutamia T-soluja. SW. 200

Me ja LB havaitsivat ristiriitaisia pienisoluisten lymfoomien tunkeutumista - trepanobioptate KM: n immunohistokemiallinen värjäys näytti myös edustavan T-reaktiivista komponenttia (kuva 12). Potilaan LB on tapahtunut HIV-infektion taustalla, ja T-soluinfiltraatio on luultavasti taudille ominainen syncytiaalinen rakenne.

Kuva 12. CM: n epäyhtenäinen pienisoluinen imusuodatus LB: hen. IHH, värjäytyminen CD3: lle

Käyttämällä erilaisten tilanteiden esimerkkiä osoitettiin, että CM: n trefiinibiopsia-näytteiden immunofenotyypitys, puhtaasti käytännöllisen arvon lisäksi, voi olla tutkimuksen kannalta kiinnostavaa. Esimerkiksi pienisoluisten lymfoidisten infiltraattien reaktiivisen T-solutyypin määrittäminen potilailla, joilla on ensisijainen ekstranodaalinen DLBL-lokalisointi, voi osoittaa tämän lymfoomamuodon suuren immunogeenisyyden verrattuna ensisijaiseen solmuun. Reaktiivisen T-komponentin subpopulaatiokokoonpanon jatkotutkimus sekä kahden erilaisen immunogeenisyyden omaavan DLBL-muodon immunofenotyypin vertailu voi valaista lymfoomien ja hemoblastoosin yleisesti kasvainvastaisen immuniteetin mekanismien ominaisuuksia.

IHH: lla, kuten muillakin menetelmillä, on tietenkin rajoituksia. Esimerkiksi sekasolu- (T- ja B-solu) imusolmukkeet perifeerisessä B-NHL: ssä havaittiin aiemmin ehdoitta reaktiivisiksi, mutta molekyyli-biologisten menetelmien kehittämisen myötä yksittäisen B-solukomponentin arvioiminen oli mahdollista. Tämän seurauksena trepanobiopsioiden arkistomateriaalin retrospektiiviseen analyysiin julkaistiin paljon julkaisuja, joissa kirjoittajat osoittivat "reaktiivisista" tunkeutumista eristettyjen B-solujen klonaalisen luonteen käyttämällä polymeraasiketjureaktiota (PCR) [85, 86]. Itse asiassa, verrattuna immunofenotyyppien määritykseen, molekyylidiagnostiikka, erityisesti PCR, on tarkempi, se sallii arvioida lymfoidielementtien vähimmäismäärän, joka määrittää sen sovellusominaisuudet - diagnosoida minimaalinen CM-tunkeutuminen lavastuksen aikana taudin alkaessa ja hallita remissiota.

Näin ollen voidaan sanoa, että trepanobiopa-KM: n materiaalin tutkiminen nykyaikaisilla menetelmillä useimmissa NHL: eissä on välttämätön testi, jonka avulla voidaan saada tärkeitä lisädiagnostiikkaan liittyviä tietoja, jotka voivat kriittisesti vaikuttaa hoitotaktiikan suunnitteluun. Luotettavin tulisi olla CM: n aspiraatti- ja trefiinibiopsian kompleksinen immunomorfologinen tutkimus (käyttäen aspiraatti-CM: n PC-menetelmää), joka määrittelee tuumorin ekstramedullisen komponentin immunofenotyypin (jos sellainen on) [27, 83, 87–90]. Hemopoieesin immunologian laboratoriossa ja tuumoritautien patologisen anatomian osastossa Blokhin RAMS on kehittänyt kattavan lähestymistavan diagnostiikkaan, mukaan lukien yksityiskohtainen histologinen tutkimus parafiinilohkojen NHL: n primaarisesta substraatista, jossa on yksityiskohtainen immunohistokemia tuoreelle materiaalille (kryostaattiosuudet), CM-aspiraattien sytokemiallinen ja immunomorfologinen arviointi täydennettynä IHC trepanobiopatasilla [91].

Materiaali otettu lehdestä "Onkohematologia", №1-2, 2006.

Luuytimen aspiraatti auttaa parantamaan haavoittumattomia haavoja.